核酸外切酶 T

产品及特点

核酸外切酶 T (Exo T) 又称核糖核酸酶 T (RNase T) ，沿 3 →5 方向特异性作用于单链 RNA 或 DNA 的 3 突出末端。核酸外切酶 T 作用于 3 突出末端，产生 RNA或 DNA 分子的平末端。具体有下列特点：

1. 特异地作用于单链 DNA 或 RNA

2. 使 DNA 或 RNA 的 3 突出端变为平齐末端

3. 无核酸内切酶和外切酶污染。

反应条件

1X Buffer 4 [50 mM 醋酸钾，20 mMTris-Ac，10 mM 醋酸镁，1 mM DTT(pH 7.9 @ 25℃) ]。 25℃ 温育。

单位定义

1 单位指 100 μl 反应体系中，25℃ 条件下，30 分钟从 1 nmol [3H]-标记的多聚胸腺嘧啶生成 0.1 nmol TCA 可溶性 DNA 所需要的酶量。

Buffer 成分

10 mM Tris-HCl，50 mM KCl，1 mM DTT，0.1 mM EDTA，200 μg/mlBSA，50% Glycerol，pH 7.4 @ 25℃

热失活

65℃ 加热 20 分钟。

备注

Exo T 对 DNA 和 RNA 的反应效率不同，DNA 是 RNA 的 100 倍。对 RNA，在标准反应条件下，完全消化 1.0 pmol rA20 需要 1 单位 Exo T，反应结果通过凝胶电泳检测。